Detection of residual B precursor lymphoblastic leukemia by uniform gating flow cytometry.

Mejstříková E, Froňková E, Kalina T, Omelka M, Batinić D, Dubravčić K, Pospíšilová K, Vášková M, Luria D, Cheng SH, Ng M, Leung Y, Kappelmayer J, Kiss F, Izraeli S, Stark B, Schrappe M, Trka J, Starý J, Hrušák O. Pediatr Blood Cancer. 2009 Sep 16. IF: 2.394

Monitorování hladiny minimální reziduální nemoci (MRN) pomocí PCR má již pevné místo v léčebných protokolech akutních lymfoblastických leukémií. V tomto článku autoři z Kliniky dětské hematologie a onkologie prezentují význam detekce MRN pomocí průtokové cytometrie.
 
Hlavní autorky MUDr. Ester Mejstříkové, Ph.D., jsme se zeptali, zda je možno průtokovou cytometrii pro detekci MRN využít a v čem je tento přístup odlišný od stanovení hladiny MRN pomocí molekulárně biologických metod?
Průtoková cytometrie detekuje konkrétní buňku nesoucí určitý fenotyp dostatečně odlišující leukemickou buňku od nemaligní. Samozřejmě pro záchyt pozitivní MRN nestačí vidět jednu buňku, která může představovat nespecificitu, ale je potřeba těch buněk vidět více. Je určitá statisitická diskuse, kolik buněk vlastně definuje tzv. cluster (shluk buněk), kdy tedy můžeme daný vzorek prohlásit za pozitivní. Molekulární genetika pracuje s DNA a kvantitativně identifikuje klonální přestavby Ig-TCR přítomné při diagnóze. Obecně je molekulární genetika citlivější, ale vytvoření pacient specifických systémů, protože každý pacient má tyto přestavby jiné, je zdlouhavé a pracné. V časných bodech léčby (den 8 a den 15), kdy ještě pacienti jsou MRN pozitivní oběma metodami, molekulárně genetické cíle nejsou zpravidla zavedeny a průtoková cytometrie je dostatečně senzitivní a rychlou metodikou pro klinické rozhodování v této fází léčby (tzv. MRN online monitoring, na základě výsledku do 24 hodin od odběru se modifikuje léčba). U části pacientů (5–10 %) se molekulárně genetické cíle nepodaří zavést vůbec. V novém protokolu pro léčbu dětské ALL, který by měl začít příští rok, bude průtoková cytometrie hodnotit MRN v den 15 od diagnózy. Druhou podskupinou pacientů, kde je MRN extrémně důležitá pro vedení léčby, jsou děti s relapsem ALL. V současné době se podílíme na zapojení detekce MRN průtokovou cytometrií do nového protokolu pro recidivy ALL, nejen pro pacienty bez molekulárně genetických cílů, ale i právě u pacientů s pomalou odpovědí formou MRN online monitoringu.

Vytvořeno: 22. 12. 2009 / Upraveno: 3. 1. 2019 / prof. MUDr. Radek Špíšek, Ph.D.